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        行業(yè)新聞

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        磁翻板液位計精確的液位控制有助于基礎(chǔ)癌癥研究

        作時間:2019-04-27 15:31:11   來源:  作者:

            “基礎(chǔ)癌癥研究的主要目的是揭示正常細胞和癌細胞之間的差異。這些差異可能會被用于尋找特定癌癥的脆弱性:任何專門針對癌癥細胞的貿(mào)易都可能為我們提供如何攻擊癌細胞的線索,同時保持健康細胞不受影響“,Dr。教授解釋道。荷蘭阿姆斯特丹癌癥研究所(NKI)的Kees Jalink 。

            今天教授博士。Kees Jalink分享了他關(guān)于NKI(荷蘭癌癥研究所)正在研究的“生物物理學(xué)和先進成像組”以及流量計和控制器在他們研究中的作用的研究。
        NKI的生物物理學(xué)和先進成像組
            解開正常細胞和癌細胞之間的這些差異已被證明是一項艱巨的任務(wù),因為大多數(shù)癌細胞的健康細胞為99.9%。在生物物理學(xué)和先進成像組,我們使用先進的顯微技術(shù)放大細胞,包括活細胞成像,熒光顯微鏡和“功能成像”技術(shù)。在后者中,使用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET),光漂白后熒光恢復(fù)(FRAP)和熒光相關(guān)光譜等技巧來提取有關(guān)蛋白質(zhì)(生物分子)及其在單個活癌細胞中的相互作用的信息。
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        活細胞產(chǎn)生更多信息
            不久前,為了通過高分辨率顯微鏡進行可視化,通常將細胞殺死,固定,染色以獲得特定成分并嵌入樹脂中。然而,成像活細胞產(chǎn)生更多信息:
        活細胞可能經(jīng)過分裂
        遷移
            相互作用形成緊密的單層,就像我們體內(nèi)的活細胞(癌癥)一樣。只有活細胞,我們才能掌握內(nèi)部生化過程的動態(tài)。
            我們提供一系列有色熒光蛋白(圖1),可以標記單一蛋白質(zhì)種類,并了解我們想要了解的蛋白質(zhì)。訣竅是,在顯微鏡上保持這些細胞的活力和健康。
            在顯微鏡下,將細胞保存在裝有DMEM培養(yǎng)基的玻璃底皿中:一種含有維生素和營養(yǎng)素的血漿樣鹽溶液。在早期,我們只是保留它們在室溫下在培養(yǎng)皿中的自由空氣(約20%氧氣2,80%N 2,0.05%CO 2)。然而,這根本不能模仿我們體內(nèi)的氣氛,因此結(jié)果并不像預(yù)期的那樣。
            例如,細胞通常拒絕分裂,大多數(shù)細胞在1-2天后死亡。而且,培養(yǎng)基中pH的控制幾乎不可能。因此,我們需要建立一個專用的培養(yǎng)箱,容納細胞和大部分顯微鏡。在這個培養(yǎng)箱中,空氣需要加熱到37°C,保濕,大氣必須與空氣不同:
        它必須包含至少5%CO 2
            并且氧氣的百分比必須在~2%和20%之間調(diào)節(jié)
            這類似于身體中遇到的各種氧氣張力。例如,眾所周知,實體瘤是缺氧的(含有少于幾個%的O 2),這完全改變了細胞的生理學(xué),以及它們對抗癌藥物的反應(yīng)。
        但如何實現(xiàn)精確的大氣控制?
            在展覽中,我們了解了Bronkhorst及其磁翻板液位計和控制器。在Bronkhorst Nederland的協(xié)助下,我們選擇了EL-FLOW Select系列的三個磁翻板液位計,并將它們連接到我們實驗室中存在的壓縮CO 2,N 2和空氣的出口。
            其余的很簡單:通過磁翻板液位計調(diào)整相對氣流,我們現(xiàn)在可以將CO 2,N 2和O 2水平設(shè)置為所有相關(guān)值。這些范圍對于氧氣為2-19%,對于CO 2為0-20%,對于氮氣為80-100%。
            從那以后,我們在這樣的受控條件下進行了所有實驗,結(jié)果更加一致 - 而且由于這個孵化器而更加相關(guān)。我們用它來研究癌細胞在轉(zhuǎn)移過程中如何遷移,以及它們?nèi)绾未┩钙渌毎麑硬⒃谶@個“利基”中生存。我們還用它來探索細胞如何使用化學(xué)信號相互通信,以及如何在細胞內(nèi)接收和隨后處理這些信號。
        μ-Flow液體磁翻板液位計開始拯救
            隨著科學(xué)的發(fā)展,解決一個問題導(dǎo)致了另一個問題的識別。我們注意到在37°C時,培養(yǎng)基蒸發(fā)得更快,幾天后細胞就會干燥,除非我們將成像盤緊閉。但這限制了細胞的進入,這使得在實驗過程中不可能為我們的研究添加生長因子,激素或抗癌藥物。
            保濕空氣僅部分解決了這一問題,因為在高濕度下會形成冷凝,可能會損壞我們設(shè)置中的敏感電子設(shè)備,因此我們必須保持低于60%的相對濕度。同樣,磁翻板液位計提供了簡單可靠的解決方案。我們?yōu)橐后w選擇了μ-FLOW磁翻板液位計,以提供非常穩(wěn)定的去離子水流。使用本地BRIGHT控制器使用PiPS(插入式電源),我們可以控制每分鐘0.5到9.6微升的水流量。
            根據(jù)經(jīng)驗,我們發(fā)現(xiàn)閥門調(diào)整到1.3 ul / min時,我們完全補償了蒸發(fā),現(xiàn)在我們能夠在顯微鏡下保持細胞存活數(shù)周。該系統(tǒng)維護成本非常低:只需安裝即可忘記,以便我們專注于我們的核心業(yè)務(wù)。磁翻板液位計在構(gòu)建顯微鏡培養(yǎng)箱和細胞方面起著關(guān)鍵作用,它們快速地分裂和發(fā)育。
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